raw264.7細(xì)胞是一種鼠源的巨噬細(xì)胞系，RAW264.7細(xì)胞貼壁快，形態(tài)以類圓形和不規(guī)則為主，一般1～2個(gè)核，少數(shù)有3個(gè)核，胞漿伸展時(shí)胞體較大。細(xì)胞貼壁緊，胰酶-EDTA難以消化，需要多次消化吹打，也可采用細(xì)胞刮法。
 

　　raw264.7細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：
 

　　1、具有很強(qiáng)的吞噬能力，當(dāng)吞噬抗原后，細(xì)胞會釋放趨化因子，進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞伸出偽足，增強(qiáng)粘附攀爬能力。細(xì)胞吞噬抗原過多、培養(yǎng)環(huán)境惡劣都會促進(jìn)該細(xì)胞呈現(xiàn)梭形、長梭形，鏡下會看到具有細(xì)長偽足的小細(xì)胞被類似上皮的梭形大細(xì)胞取代。
 

　　2、每次傳代都很難消化下來。用力過大則對細(xì)胞損傷較大，這種細(xì)胞傳代時(shí)接種密度要大，否則容易使巨噬細(xì)胞向終末細(xì)胞分化，細(xì)胞變成長形，并且不能回復(fù)，這是培養(yǎng)這種細(xì)胞時(shí)需要注意的問題。
 

　　3、生長時(shí)喜歡結(jié)伴。正常生長狀態(tài)應(yīng)該是一小片一小片的生長，片片之間不連接，等到長到更多更密的時(shí)候會連成大片，并且會疊加成層。所以，要很好地控制好細(xì)胞的生長速度，不要等到疊加成層的時(shí)候再傳代。
 

　　4、傳代后貼壁時(shí)間較短，半小時(shí)就能貼很多，剛貼壁是細(xì)胞呈圓形，折光度很好，鏡下觀察如小珍珠狀一個(gè)個(gè)地散落于瓶底面。生長一段時(shí)間后，部分細(xì)胞會變成類似四角形，伸出偽足之類的。這個(gè)時(shí)候就是提醒你注意傳代了，這部分細(xì)胞如再不傳代，很容易就老化掉。
 

　　raw264.7細(xì)胞破骨細(xì)胞分化：在RANKL的誘導(dǎo)下，RAW264.7細(xì)胞可以分化為成熟的破骨細(xì)胞，此時(shí)應(yīng)用破骨細(xì)胞特異性的抗酒石酸酸性磷酸染色(TRAP染色)，在有成熟破骨細(xì)胞的部位可見紅色的陽性反應(yīng)，所以一般認(rèn)為RAW264.7是一種前破骨細(xì)胞。 向破骨細(xì)胞的分化是一個(gè)NF-kb通路依賴的過程，先前的大量研究表明，NF-kb通路受到抑制時(shí)，RAW264.7細(xì)胞不能向破骨細(xì)胞的分化。